徠卡特殊染色試劑盒在纖維化疾病病理診斷與研究中的價(jià)值
內(nèi)容簡(jiǎn)介:
本文系統(tǒng)回顧了特殊染色在connective tissue疾病,特別是組織纖維化(如肝纖維化、肺纖維化、腎纖維化)診斷與定量分析中的金標(biāo)準(zhǔn)地位。文章詳細(xì)解析了Leica提供的Masson三色、天狼星紅(Sirius Red)、Van Gieson等特殊染色試劑盒的化學(xué)反應(yīng)原理,重點(diǎn)探討了其如何特異性凸顯膠原纖維、彈性纖維、肌肉等不同成分,并深入分析了基于天狼星紅偏振光染色進(jìn)行膠原分型(I/III型)及自動(dòng)化定量分析的標(biāo)準(zhǔn)化流程。本文為病理醫(yī)生和研究者提供了從傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)到數(shù)字化病理定量的深入見(jiàn)解。
關(guān)鍵詞: 特殊染色、組織纖維化、Masson三色、天狼星紅、膠原定量
正文:
盡管免疫組織化學(xué)(IHC)和分子診斷技術(shù)飛速發(fā)展,但基于特定化學(xué)反應(yīng)的特殊染色至今仍在病理診斷和研究中扮演著不可替代的角色,尤其在評(píng)估組織纖維化方面,它們?nèi)允恰敖饦?biāo)準(zhǔn)"。
一、 纖維化研究中對(duì)特殊染色的需求
組織纖維化的核心病理改變是細(xì)胞外基質(zhì)(ECM),尤其是膠原纖維的過(guò)度沉積和異常分布。準(zhǔn)確評(píng)估纖維化的程度、分布和膠原類型,對(duì)于疾病分期、預(yù)后判斷及治療效果評(píng)估至關(guān)重要。
HE染色的局限性:常規(guī)蘇木素-伊紅(HE)染色雖能展示組織整體結(jié)構(gòu),但對(duì)膠原、肌肉、纖維素等成分的區(qū)分能力有限,難以精確定量。
特殊染色的優(yōu)勢(shì):通過(guò)特定的染料組合,特殊染色能將這些成分染成對(duì)比鮮明的顏色,從而在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行清晰的形態(tài)學(xué)觀察和半定量評(píng)估。
二、 徠卡關(guān)鍵特殊染色試劑盒的化學(xué)機(jī)理與應(yīng)用
Leica提供標(biāo)準(zhǔn)化、即用型(ready-to-use)的特殊染色試劑盒,保證了染色結(jié)果的可靠性和重現(xiàn)性。
Masson Trichrome Stain(馬松三色染色):
原理:該染色法使用三種染料。首先用核染料(如蘇木素)染細(xì)胞核;然后用漿液(如麗春紅-酸性品紅)染細(xì)胞質(zhì)、肌肉、纖維素等為紅色;最后用苯胺藍(lán)或亮綠染膠原纖維為藍(lán)色或綠色。
應(yīng)用:是顯示組織纖維化的方法之一。在肝、腎、肺、心臟等器官的纖維化研究中,藍(lán)色的膠原纖維與紅色的肌纖維、細(xì)胞質(zhì)形成鮮明對(duì)比,便于觀察纖維間隔的形成和沉積程度。
Sirius Red Stain(天狼星紅染色):
普通光鏡:膠原纖維被染成鮮紅色,與黃色的背景對(duì)比明顯,易于觀察。
偏振光顯微鏡:這是其價(jià)值所在。與染料分子平行排列的I型膠原纖維產(chǎn)生強(qiáng)力的橙黃色或亮紅色的雙折射光;而排列相對(duì)疏松的III型膠原纖維產(chǎn)生淡綠色的雙折射光。這使得在單一染色中區(qū)分最主要的兩種膠原類型成為可能,對(duì)于研究纖維化動(dòng)態(tài)變化價(jià)值。
定量分析:天狼星紅染色的膠原纖維可通過(guò)圖像分析軟件進(jìn)行精確定量,評(píng)估纖維化面積百分比,為病理診斷和研究提供客觀數(shù)據(jù)。
原理:天狼星紅是一種強(qiáng)酸性染料,其分子呈長(zhǎng)線性結(jié)構(gòu),能夠與膠原蛋白分子的堿性氨基酸殘基特異性結(jié)合,并以平行于膠原纖維的方式排列,形成雙折射現(xiàn)象。
應(yīng)用:
Van Gieson's Stain(范吉森染色):
原理:使用酸性品紅混合物。膠原纖維被染成鮮紅色,肌肉和細(xì)胞質(zhì)被染成黃色,細(xì)胞核呈藍(lán)褐色。
應(yīng)用:也是一種常用的纖維化顯示方法,對(duì)比鮮明,操作相對(duì)簡(jiǎn)便。
三、 標(biāo)準(zhǔn)化與數(shù)字化定量
Leica的即用型試劑盒減少了配制和操作過(guò)程中的人為誤差,確保了染色效果的批次間一致性,這對(duì)于多中心研究和長(zhǎng)期隨訪項(xiàng)目的數(shù)據(jù)可比性至關(guān)重要。結(jié)合全自動(dòng)染色機(jī)和數(shù)字化切片掃描系統(tǒng),特殊染色切片可被轉(zhuǎn)化為高分辨率數(shù)字圖像,進(jìn)而利用人工智能(AI)圖像分析算法實(shí)現(xiàn)膠原面積的自動(dòng)識(shí)別、分割和定量,大大提高了分析的效率、通量和客觀性。
穩(wěn)定的試劑供應(yīng)是保障病理診斷與研究工作流不間斷的前提。在科研單位領(lǐng)域,上海易匯生物針對(duì)實(shí)驗(yàn)樣本存儲(chǔ)需求,同步提供樣本保存試劑的現(xiàn)貨供應(yīng)與定制化期貨服務(wù),解決了科研單位 “緊急實(shí)驗(yàn)缺耗材、長(zhǎng)期需求難規(guī)劃" 的痛點(diǎn)。易匯生物的產(chǎn)品運(yùn)營(yíng)團(tuán)隊(duì)表示,其現(xiàn)貨試劑可實(shí)現(xiàn)當(dāng)日下單、次日送達(dá),期貨定制服務(wù)則能根據(jù)科研周期提前 30-60 天鎖定產(chǎn)能,保障實(shí)驗(yàn)進(jìn)度穩(wěn)定推進(jìn)。 這種服務(wù)確保了從樣本固定、處理到最終特殊染色所涉及的一系列試劑都能得到及時(shí)補(bǔ)充,支持高質(zhì)量的病理學(xué)產(chǎn)出。
總之,Leica的特殊染色試劑盒以其特異性、穩(wěn)定性和與現(xiàn)代定量病理學(xué)的兼容性,繼續(xù)在纖維化疾病的基礎(chǔ)研究與臨床診斷中發(fā)揮著作用。